肺炎克雷伯菌β?內酰胺酶檢測與相關耐藥表型分析

肺炎克雷伯菌β?內酰胺酶檢測與相關耐藥表型分析

肺炎克雷伯菌β?內酰胺酶檢測與相關耐藥表型分析 ［摘要］ 目的：研究呼吸科肺炎克雷伯菌對14種常用抗生素的耐藥性及其產超廣譜β?內酰胺酶(ESBLs)菌株的檢出率。方法：選擇從臨床呼吸科分離的肺炎克雷伯菌，用K?B紙片擴散法、雙紙片協同試驗和紙片確證試驗篩選和確認產ESBLs的菌株。結果：3 a中呼吸科肺炎克雷伯菌產ESBLs總檢出率為36.7%(94/256)，產ESBLs菌株對亞胺培南高度敏感(100%)，對氨芐西林、頭孢唑林、頭孢噻肟、頭孢曲松、慶大霉素、環丙沙星均有極高的耐藥性(耐藥率＞80%)，高于不產ESBLs組，差異有顯著性(P＜0.005)。結論：呼吸科肺炎克雷伯菌產ESBLs菌株的'臨床分離率高，對多種抗生素具有較高耐藥性，亞胺培南是治療產ESBLs肺炎克雷伯菌感染的首選藥物。

　　［關鍵詞］ 肺炎克雷伯菌；β?內酰胺酶；耐藥性；呼吸科

　　質粒介導的超廣譜β?內酰胺酶(ESBLs)的產生和傳播是革蘭陰性桿菌對β?內酰胺類抗生素耐藥的重要原因之一［1］。肺炎克雷伯菌是最常見的產ESBLs菌株［2］，已成為醫院感染的重要病原菌之一，可造成嚴重的醫院感染暴發和院外耐藥菌株的傳播［3］。特別是質粒介導的ESBLs因其底物譜廣、傳播速度快而引起廣泛關注。我們對2003年1月至2005年12月本院呼吸科分離的肺炎克雷伯菌進行了抗生素敏感度測定及對產ESBLs菌株進行了檢測，現報道如下。

　　1　材料與方法

　　1.1　材料

　　1.1.1　菌株　肺炎克雷伯菌來源于2003年1月至2005年12月本院呼吸科患者送檢痰標本，10天內分離出相同菌種取第1次分離株。

　　1.1.2　試劑　API試條、M?H瓊脂(法國梅里埃公司產品)，藥敏紙片：頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢噻肟/棒酸、頭孢他啶/棒酸購于英國Oxoid公司，其他藥敏紙片購于杭州天和微生物試劑廠。

　　1.2　方法

　　1.2.1　菌種鑒定　根據《全國臨床檢驗操作規程》操作，采用API試條和APILAB PLUS細菌鑒定系統進行細菌鑒定。

　　1.2.2　藥敏試驗　采用K?B法，結果判讀按NCCLS 2002年推薦標準。

　　1.2.3　ESBLs檢測　采用雙紙片協同試驗法，選取對頭孢噻肟耐藥或中介耐藥的肺炎克雷伯菌株，按常規紙片擴散法在M?H瓊脂平板上涂布受試菌，先在平板中心貼上20 μg/1 μg阿莫西林/克拉維酸紙片，爾后在其上下左右貼30 μg/片頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢他啶和氨曲南紙片，其紙片中心距復合劑紙片中心30 mm或20 mm，35 ℃孵育18 h～20 h。如周圍4個藥敏紙片中有任何一個抑菌環在靠近復合紙片一側的邊緣出現擴大或增強，說明該菌產ESBLs。如結果可疑或協同試驗陰性，但K?B藥敏結果提示可能產ESBLs，則用確證試驗驗證，結果按美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)2002年推薦的標準判讀。ESBLs陰性質控株為大腸埃希菌ATCC 25922，ESBLs陽性質控菌為ATCC 700603。

　　2　結果

　　2.1　ESBLs檢出率　3年中從下呼吸道感染標本中共檢出256株肺炎克雷伯菌，其中有94株產ESBLs，檢出率為36.7%(94/256)，較盧小軍等［4］報道的19.6%要高得多，較朱冬林等［5］報道的43.1%低。3年中呼吸科下呼吸道感染標本中產ESBLs肺炎克雷伯菌分離率，分別為33.3%(20/60)、37.5%(30/80)、37.9%(44/116)。

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