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      2. 檢驗(yàn)技師考點(diǎn):IgG純化

        時(shí)間:2024-07-29 17:36:52 檢驗(yàn)技師/士 我要投稿
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        檢驗(yàn)技師考點(diǎn):IgG純化

          鹽析法只能部分純化抗體,更高純度的抗體制劑可用層析法制備。IgM五聚體相對(duì)分子質(zhì)量達(dá)9.7×10,比血清中任何其他蛋白都大,用分子篩層析很容易將其純化。IgG在PH 8.0時(shí)帶負(fù)電荷,能與DEAE纖維素上的陽離子結(jié)合,因此可用離子交換層析來純化IgG.IgG純化最常用的方法為親和層析。IgG與葡萄球菌A蛋白和鏈球菌G蛋白具合高度的親和性,可用這兩種蛋白質(zhì)交聯(lián)親和層析柱將IgG純化。大部分IgG與蛋白A結(jié)合PH為8—9,洗脫P(yáng)H為2—4;而與蛋白G的結(jié)合PH為5—7,洗脫P(yáng)H為9—10.C蛋白更適合于IgG的純化,不但反應(yīng)條件為溫和的弱酸性或弱堿性,并且與IgG的結(jié)合力高于A蛋白。G蛋自能與大部分動(dòng)物種類的IgG結(jié)合,而A蛋白對(duì)小鼠IgG1、大鼠IgG2b、人IgG3、馬和綿羊IgG結(jié)合力弱或不能結(jié)合G蛋白和A蛋白均不能與雞IgG結(jié)合。

          生理作用:

          IgG的功能作用主要在機(jī)體免疫中起保護(hù)作用,大多數(shù)抗菌、抗病毒;應(yīng)對(duì)麻疹、甲型肝炎等,能有效地預(yù)防相應(yīng)的感染性疾病。

          IgG是唯一可以通過胎盤的免疫球蛋白。來自母體的IgG在出生后數(shù)月對(duì)防御白喉、麻疹、脊髓灰質(zhì)炎等感染起著重要作用,母體傳遞給胎兒的IgG于生后6個(gè)月幾乎全部消失,而嬰兒自身產(chǎn)生IgG從3個(gè)月時(shí)才逐漸增多,故6個(gè)月后易患感染。3-5歲是漸接近成人水平。

          生理性變化:

          胎兒出生前可從母體獲得IgG,在孕前期22~28周間,胎兒血IgG濃度與母體血IgG濃度相等,出生后母體IgG逐漸減少,到第3、4月胎兒血IgG降至最低,隨后胎兒逐漸開始合成IgG,血清IgG逐漸增加,到16歲前達(dá)到成人水平。

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