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血漿t-PA水平與血栓疾病的研究分析
【關鍵詞】 血漿纖溶酶原激活物；血栓疾病
當今世界，血栓性疾病已成為中老年人的第一殺手，全世界每年死于心血管病的人數超過1200萬人，美國每年有250萬人患血栓病，死亡超過20萬人［1］，我國每年死于心血管疾病的人數超過200萬人，其每年的死亡人數占全國疾病死亡人數的60%，尤其是血栓性疾病，如急性心肌梗死、腦血栓、深靜脈血栓等疾病的發病率升高，使該類疾病成為嚴重威脅人類健康的疾病之一［2］。估計每年至少有300萬人次需要使用溶血栓藥物進行治療。因此，尋找安全、無創傷、能準確定位并可評價生理功能的診斷方法，研究特異、高效溶栓劑就顯得特別重要。血栓形成在許多心血管事件的發生中起著重要的作用。血栓性疾病的突發性是該病病死率和致殘率高的重要原因。因此研究血栓傾向的預報方法，防患于未然，對血栓病的防治具有深遠的臨床意義。
1 對象與方法
1.1 研究對象 收取我院自2005年1～12月收治的腦血栓患者67例，深靜脈血栓患者28例，心肌梗死患者42例。正常對照組40例，為健康查體者。四組均采集外周血樣本。
1.1.1 腦血栓組 男39例，女28例，年齡35～80歲，中位年齡62歲。全部病例符合1995年第四屆全國腦血管疾病學術會議修訂的診斷標準，均經CT或MRI證實。排除腦出血及心、肝、腎、血液系統疾患者。1個月內未服用抗血小板藥物、抗凝藥及影響纖溶活性的藥物。
1.1.2 深靜脈血栓組 男22例，女6例，年齡37～75歲，中位年齡56歲。全部病例經彩色多普勒或靜脈造影確診。
1.1.3 心肌梗死組 男25例，女17例，年齡35～78歲，中位年齡58歲。全部病例均符合1979年WHO心肌梗死診斷標準，所有心肌梗死患者均為初發病例，并排除繼發性高血壓、糖尿病及血液系統疾病，且所有入選者均未服用過影響t-PA的藥物。
1.1.4 健康對照組 男20例，女20例，年齡35～72歲，中位年齡56歲。選擇同期到我院體檢的年齡、性別與觀察組相匹配的健康體檢者。所有人員均無心腦血管疾病，無肝、腎疾病，血壓、血脂、血糖及心電圖均正常。
1.2 方法 受試者經10h過夜空腹，負壓抽取靜脈血2.8ml置于含3.8%枸櫞酸鈉0.2ml的抗凝管中，混勻后以3000轉/min，離心10min，收集上層血漿。采用雙抗體夾心固相酶聯免疫吸附法(ELISA)定量測定t-PA抗原水平。t-PA標準品以稀釋液復溶至60ng/ml,并以稀釋液稀釋后配制標準t-PA系列。
1.3 統計學分析 采用SPSS11.5軟件統計分析，計量資料以x±s表示。采用t檢驗，以P＜0.05為有統計學意義。
2 結果
所有入組人員外周血tPA檢測結果見表1。
表1 各組人員外周血tPA的檢測結果 (略)
腦血栓組患者外周血t-PA增高，與正常對照組比較明顯增高，兩者差異有顯著性(P＜0.01)。心肌梗死組患者及深靜脈血栓組患者t-PA含量增高雖不如腦梗死患者顯著，但與正常對照組比較差異仍有顯著性(P＜0.01)。
3 討論
3.1 t-PA測定的意義 血栓形成是一個十分復雜的生理、病理過程，涉及包括血細胞、血漿因子和血管壁在內的多種因素。趙鈦［3，4］和Jafri［5］等研究表明，絕大多數腦血栓形成病人，在發病前可檢出一種或多種血栓前狀態分子標志物的改變，其中，纖溶系統有損害者占很大比例。纖溶系統是血液內與凝血系統相拮抗的多酶系統，在維持血液凝血與纖溶的動態平衡中起重要作用。其最重要的生理功能是降低血管壁上的纖維蛋白沉積物，溶解凝血塊，維持血液在血管內正常流動。纖溶系統的損害與多種血栓性疾病的發病密切相關。近年來的研究發現，組織型纖溶酶原激活物及其抑制物PAI-1是纖溶系統的兩個重要組成部分［6］。是反映體內纖溶活性的重要指標，主要來源于血管內皮細胞，被稱之為內皮細胞的標記物。國內外文獻報道，血漿t-PA、PAI-1的活性與腦血栓形成關系密切。血漿t-PA活性水平降低，PAI-1水平增高，已被認為是一種危險狀態，提示患者有可能發生血栓。t-PA在各種生理或病理因素如運動、緊張、血管損傷或血栓形成等刺激下可大量釋放進入血循環［7］，激活并產生纖溶酶，從而清除血管內的血凝塊，保持血管暢通。內源性t-PA除有強大的溶栓效果外，在調節血栓形成和再灌注方面也起著關鍵作用。臨床研究發現，血漿t-PA抗原水平升高和(或)t-PA活性降低是心腦血管疾病并發血栓形成的危險因素［8，9］。因此，盡管血栓形成是許多因素共同參與的結果，但密切觀察t-PA纖溶能力指標的變化，對判斷血栓栓塞性疾病的形成和發展無疑有著十分重要的意義。
在過去幾年中，血栓性疾病的實驗診斷進展不快，在20世紀80年代以前僅有為數不多且靈敏性不高的幾個指標，譬如凝血酶原時間、活化的部分凝血酶時間、凝血因子水平(因子Ⅷ、因子Ⅶ、因子Ⅴ、纖維蛋白原)、血小板黏附性和聚集性、血小板數、體積和壽命等。事實證明，僅利用檢查血漿凝血因子或血漿抑制物的水平，以及測定其在循環中的代謝率來監測血栓或血栓前狀態，在大多數情況下往往不能成功，因為這些體外實驗反映的體內凝血因子水平，并非體內凝血活化狀態，不能直接相關于血栓形成傾向。近年來研究的焦點集中于凝血瀑布反應中凝血因子被水解生成的片段，以及血小板活化后，血管內皮損傷所產生的特異性產物，它們可以直接反應凝血過程中某一反應階段的活化，因此，它們是體內凝血活化的分子標志物。近處來迅速發展的分子標志物，目前已有50多種，在血栓性疾病的診斷中具有較好的靈敏性及與疾病發展的一致性。而t-PA是反映纖溶系統活化的重要分子標志物之一，關于血內t-PA水平的研究已成為當代血流自穩態研究的熱點之一。
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