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富硒板黨對大鼠學習記憶及抗氧化酶影響
【關鍵詞】 富硒板黨
恩施板橋黨參(簡稱板黨)為桔?泣h參屬植物的干燥根,因生長在湖北恩施板橋鎮而得名,為我國名貴材,也是非常好的滋補品〔1〕。其根含有豐富的多糖、甾醇、甾酮、苷類、氨基酸、膽堿及微量元素如硒等,對中樞神經系統、心血管系統、消化系統、免疫系統、血液和造血系統都有重要改善作用,是益氣補脾的上乘良藥〔2〕。現代研究認為,中樞神經系統功能退變是人體衰老的關鍵,并與代謝產生的氧自由基慢性損傷或抗氧化酶不足密切相關。本試驗用富硒板黨注射液腹腔注射,通過對大鼠行為學觀察和組織超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH?Px)含量測定,探討富硒板黨注射液對大鼠學記憶能力及抗氧化酶的影響,進一步探討其改善中樞神經系統功能的作用機制。
1 與方法
1?1 黨參注射液制備
富硒板黨[恩施板橋鄉中藥材生產質量規范(GAP)示范基地]。采用水提醇沉法制成含生藥30%的注射液,瓶裝密封消毒備用。用雙道束原子熒光光譜法測定硒的含量為0?72?μg/ml。
1?2 藥品及實驗儀器
氟哌啶醇注射液(湖南洞庭藥業股份有限公司);SOD、GSH?Px試劑盒(南京建成生物工程研究所);回避反應箱(華中科技大學同濟醫學院自制);GL?20G II型高速低溫離心機,UV?2450分光光度儀,水浴箱。
1?3 大鼠電跳臺行為學訓練及測試
跳臺實驗參照文獻〔3〕進行。末次給藥15?min后將大鼠輕放于回避反應箱內訓練,適應3?min,隨后底部銅柵通電(36V)2?s,訓練時間為3?min。24?h后再進行行為學測試,記錄各鼠第一次跳下平臺的潛伏期和3?min跳下平臺的錯誤次數。
1?4 實驗動物分組
雄性Wistar大鼠50只,鼠齡40~50周,體重300~350?g(華中科技大學同濟醫學院動物中心),隨機分為對照組、模型組、富硒板黨高劑量組、中劑量組和低劑量組,每組10只。模型組按1?g/(kg·bw)腹腔注射氟哌啶醇注射液,富硒板黨高、中、低劑量組分別在注射氟哌啶醇的同時,按7?2,3?6,1?8?g/(kg·bw)腹腔注射富硒板黨注射液,對照組每天等量腹腔注射生理鹽水,各組用藥為2次/d注射,連續用藥7?d。實驗動物造模參照文獻〔4〕。
1?5 SOD、GSH?Px測定
行為學測試結束后斷頸處死大鼠,迅速取血及各種組織,血液離心取血清,組織制成10%勻漿,備用。SOD、GSH?Px測定,按試劑盒說明書進行,蛋白定量采用雙縮脲法測定。
1?6 分析
采用SPSS11?5統計軟件進行方差分析(ANOVA),計量資料用均數加減標準差表示,對不符合ANOVA的數據,用非參數(Kruskai?Wallis Test)進行比較分析。
2 結果
2?1 富硒板黨對大鼠學習記憶能力的影響
富硒板黨各劑量組與模型組比較均能延長實驗大鼠的跳臺潛伏時間,減少3?min犯錯次數,高、中劑量尤其明顯(P<0?01),提示富硒板黨能維持實驗大鼠學習記憶能力,見表1。表1 富硒板黨對大鼠學習記憶能力的影響(略)注:與模型組比較,*P<0?01,**P<0?05
2?2 富硒板黨對大鼠血及組織SOD、GSH?Px影響
富硒板黨注射液各劑量組與模型組比較均能提高血液、海馬、腦皮質及肝腎SOD、GSH?Px表達值,高、中劑量組作用明顯(P<0?01),見表2,3。表2 富硒板黨對大鼠血及組織SOD的影響(略) 注:與模型組比較,*P<0?01,**P<0?05表3 富硒板黨對大鼠血及組織GSH-Px的影響(略)注:與模型組比較,*P<0.01,**P<0.05
3 討 論
多者認為,體內自由基的濃度與學習記憶功能密切相關,隨著年齡的增加,由于抗氧化酶活性不斷下降,體內產生的過量氧自由基無法及時清除,造成細胞代謝和功能形態的改變,導致細胞的衰老。SOD和GSH-Px是重要的抗氧化酶系,能清除氧自由基、降低細胞內H2O2水平、減少自由基和過氧化物蓄積導致的細胞毒性作用〔5〕。肖本見等研究表明,富硒板黨能減弱苯異丙腺苷致小鼠學習記憶障礙,對小鼠具有益智和抗氧化作用〔6〕。本實驗結果表明,富硒板黨能減弱氟哌啶醇致大鼠的學習記憶障礙,維持實驗大鼠學習記憶能力,顯著提高實驗大鼠血、肝、腎、海馬、腦皮質SOD、GSH?Px的表達量,與肖本見等〔6〕的研究一致,說明富硒板黨具有清除氧自由基、改善記憶抗衰老、老年性癡呆等作用。其作用機制可能與富硒板黨所含膽堿、多糖及微量元素硒有關。為進一步開發及其應用、健康等方面提供了學實驗依據。
【參考文獻】
〔1〕殷智.黨參商品名稱辨析[J].湖北雜志,2001,23(11):49-50.
〔2〕肖培根.新編中藥志[M].北京:化學出版社,2001,1:811-812.
〔3〕H Gerhard vogel(著),杜冠華(譯).藥實驗指南—新藥發現和藥理學評價[M].北京:科學出版社,2001:444-445.
〔4〕黃麗亞,葉嗣潁.黨參注射液上調抗氧化酶表達作用的實驗研究[J].中國老年學雜志,2006,26(1):70-71.
〔5〕陳勤.抗衰老研究實驗方法[M].北京:中國科技出版社,1996:43.
〔6〕肖本見,譚志鑫,陳國棟,等.富硒板黨對小鼠益智和低氧/復氧損傷的保護作用研究[J].中國衛生,2005,21(11):1368-1369.
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