細胞免疫功能的檢測在乙肝診治中的意義和價值
【摘要】目的 研究乙型肝炎患者外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞的變化及臨床意義。方法 采用流式細胞儀檢測108例乙肝患者和40例健康者外周血T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）、NK細胞活性。結果 各臨床類型乙肝患者NK細胞活性降低， 與正常組比較差異有顯著性（P<0.01）；慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎、肝硬化組患者外周血CD3+、CD4+、CD8+均下降，其中慢性重型乙型肝炎外周血CD3+、CD8+與正常組比較差異有顯著性（P<0.01），急性乙型肝炎患者外周血T細胞亞群變化不明顯（P>0.05）。結論 慢性乙肝患者存在細胞免疫功能紊亂，免疫功能的檢測對乙肝的診斷、治療及預后的判斷有著重要意義。【關鍵詞】乙型肝炎 細胞免疫 T淋巴細胞亞群
機體免疫調節功能紊亂是造成乙肝病毒（HBV）致病的重要原因之一。為了探討乙型肝炎患者機體細胞免疫功能狀態，本文檢測了108例乙型肝炎患者和40例健康者外周血T淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）、NK細胞活性，現將結果報告如下。
1 材料與方法
1.1研究對象 108例病例均為我院2007年11月～2010年8月住院病人，男71例，女37例，年齡18～69歲，平均44.2歲。其中急性乙型肝炎28例、慢性乙型肝炎29例、慢性重型乙型肝炎27例、肝硬化24例，所有病例均符合2000年西安會議修訂的病毒性肝炎防治方案診斷分型標準[1]。選擇健康獻血員40例作為正常對照組。所有病例近半年內未使用免疫調節劑和抗病毒治療。
1.2實驗方法 外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞活性檢測采用流式細胞檢測技術。具體方法如下：①標本處理：抽取病人外周血2ml于EDTA-K2抗凝管內，6小時內分析；②試劑和儀器：CD3/CD4/CD8三色熒光標記試劑，BD公司提供。儀器為美國Beckman Coulter公司提供的Beckman coulter—3XL流式細胞儀。
1.3統計學方法 結果以均數±標準差(x-±s)表示，組間數據采用方差分析和t檢驗，p<0.05為差異有顯著性，數據處理用SPSS10.0統計軟件完成。
2 結果
2.1乙型肝炎患者外周血T淋巴細胞亞群和NK細胞檢測結果 見表1， 各臨床類型乙型肝炎患者NK細胞活性降低，與正常組比較差異有顯著性（P<0.01），以慢性重型肝炎組下降最明顯。慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎、肝硬化組患者外周血CD3+、CD4+、CD8+均有不同程度下降，其中慢性重型乙型肝炎外周血CD3+、CD8+下降最明顯，與正常組比較差異有顯著性（P<0.01）；慢性重型肝炎組CD3+、CD8+與急性、慢性肝炎和肝硬化組比較差異有顯著性（P<0.01）。各臨床類型組外周血CD4+均下降，但與正常組比較差異無顯著性（P>0.05）；急性乙型肝炎患者外周血T細胞亞群與正常組比較無統計學差異（P>0.05）。
表1 乙型肝炎患者T淋巴細胞亞群和NK細胞的活性[ (x-±s)% ]
組別 例數 CD3+ CD4+ CD8+ NK
對照組 40 65.58±10.18 37.46±7.38 27.62±5.46 23.69±9.68
急性肝炎 28 70.56±11.08△★ 36.31±8.80△ 27.36±9.64△ 16.70±10.09﹡
慢性肝炎 29 65.55±8.44△★ 36.24±7.11△ 24.64±7.59△★ 15.36±8.95﹡
慢性重型肝炎 27 56.58±13.80﹡ 36.04±12.41△ 19.33±8.07﹡ 10.33±6.75﹡
肝硬化 24 63.02±13.52﹡★ 31.64±10.46△ 23.65±7.20△★ 17.45±10.87
﹡ 注：與對照組比較，﹡P<0.01，△P>0.05；與慢性重型肝炎比較，★P<0.01。 3 討論
HBV感染機體后，并不直接損傷肝細胞，而是通過誘導機體免疫間接損傷肝細胞[2]。細胞免疫反應是HBV感染后引起肝細胞損害的主要機制[3]。淋巴細胞是人體主要的免疫細胞，其數量的變化在一定程度上反映了機體的免疫水平。本實驗顯示，急性乙型肝炎患者外周血T細胞亞群變化不明顯，而慢性乙型肝炎、慢性重型乙型肝炎、肝硬化組外周血CD3+、CD4+、CD8+百分率均低于對照組，說明乙型肝炎慢性化的進程和機體免疫功能紊亂有關，慢性乙肝患者普遍存在不同程度的細胞免疫功能低下，其中代表細胞毒性T細胞的CD8+細胞低下是機體無法有效清除病毒，使得病程慢性遷延的主要原因[4]。慢性重型乙型肝炎組CD3+、CD4+、CD8+明顯低于其他臨床組，其變化與病情嚴重程度一致，提示外周血T淋巴細胞的變化可作為慢性重型肝炎病情發展、療效和預后的觀察指標。臨床不同類型HBV感染者NK細胞百分率明顯下降，與正常組比較差異有顯著性（P<0.01），尤其慢性重型肝炎下降最明顯，與慢性肝炎、肝硬化組比較差異有顯著性（P<0.05），由于NK細胞活性下降，導致機體干擾病毒復制和抗感染能力下降，HBV在體內持續存在，導致HBV感染的慢性化，因此NK細胞的減少與乙型肝炎慢性化有密切關系。
慢性乙肝患者存在細胞免疫功能的紊亂，動態觀察相應的指標，可了解肝病患者的細胞免疫功能狀態，為臨床治療及預后評估提供實驗室依據。
參 考 文 獻
[1]中華醫學會肝病學分會、中華醫學會感染病學分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華傳染病雜志，2001，19（4）：56-62.
[2]王毅娟.外周血T淋巴細胞亞群檢測對乙型肝炎患者的意義[J].臨床和實驗醫學雜志，2007，11（8）：333-335.
[3]何英，張云奇，吳潤香，等.慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細胞亞群變化與病毒復制的關系[J].醫學檢驗，2009，24：11.
[4]張恒輝，郭芳，費然，馬慧，叢旭，魏來，陳紅松.慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+調節性T細胞免疫抑制功能的研究[J].中華醫學雜志，National Medical Journal of China，2008，08（6）：285-288.
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