利用毒效組分含量控制附子臨床湯劑工藝研究論文

利用毒效組分含量控制附子臨床湯劑工藝研究論文

　　1 儀器與材料

　　分光光度計：Perkin?Elmer Lambda 35型；電子分析天平：Sartorius系列十萬分之一（德國）；pHS?2型酸度計（上海雷磁儀器廠）。對照品：烏頭堿（110720?200208，中國藥品生物制品檢定所）；乙醇、溴甲酚綠、氯仿、乙醚、氨水皆為分析純。其他試劑自備。生附子由成都中醫藥大學中藥鑒定教研室嚴鑄云副教授鑒定為烏頭Aconitum carmichaeli Debx.的側生子根及加工品。黑順片，白附片為同批加工品，購于四川江油GAP生產基地，質量均符合藥典規定。

　　2 方法與結果

　　2.1 藥材毒效因子的測定離子對溴甲酚綠法測定總生物堿是經典的生物堿測定方法，本研究參考文獻［5］中的方法，酯型生物堿測定方法參考2005版《中國藥典》［4］制川烏項下測定法測定。水提液樣品的前處理略做修改，并進行了方法學考察，結果符合穩定性、精密度、加樣回收率均達到定量要求。依前法測定藥材TA和EA，并計算毒效因子，結果見圖1。結果表明，附子炮制后毒效成分比例變化有差異，黑順片中毒性成分占總生物堿比例增大，白附片中毒性成分占總生物堿比例減少。提示不同炮制方法改變了毒效組分比例。

　　2.2 水煎過程控制研究

　　2.2.1 供試液的制備分別取生附子、黑順片，白附片粗粉（1號篩）適量，精密稱定，置圓底燒瓶中，加10倍量水，浸泡30 min，回流，快速燒開后，保持微沸2 h；趁熱粗濾，用適量水洗滌殘渣3次，合并洗液和濾液，3 000 r/min離心（5 min），過濾，70℃下減壓濃縮至1∶1體積；用氨水調pH=9～10，TA測定用乙醚一氯仿（3:1）的混合液、EA測定用乙醚萃取3次，置蒸發皿中水浴低溫揮干溶劑，備用。

　　2.2.2 加水量的影響取3批藥材適量各7份，分別加6，8，10，12倍量水，依“2.2.1”項方法制備，備用。依前法測定TA和EA，并計算毒效因子，結果見圖2。結果表明，水煎過程顯著降低了各樣品的毒性，提高了其毒效因子水平；其中黑順片影響最大，白附片影響最小。不同加水量對炮制品毒效因子影響較小。提示水煎過程中毒效組分溶出水平有差異，加水量對其影響較小。

　　2.2.3 煎煮時間的影響取3批藥材適量各7份，分別加水煎煮2，4，6，8，12 h，依“2.2.1”項方法制備，備用。依前法測定TA和EA，并計算毒效因子，結果見圖3。結果表明，煎煮時間對生、炮制品的毒效因子影響截然不同；其中對生附子影響較小，對炮制品而言，6 h后黑順片和白附片毒效因子水平正好相反。提示控制煎煮時間可以改變不同炮制品的毒效因子水平。

　　2.2.4 煎煮次數的影響取3批藥材適量各7份，分別加水煎煮3次A（2?0.5?0.5），B（2?1?1），C（2?2?2）依“2.2.1”項方法制備，備用。依前法測定TA和EA，并計算毒效因子，結果見圖4。結果表明，煎煮次數顯著改變生、炮制品的毒效因子；其中生品影響最大。提示單煎有利于毒效組分的穩定。

　　2.2.5 濃縮條件的影響取3批藥材適量各4份，濃縮分別采用60℃，70℃，80℃減壓濃縮，100℃蒸發至1∶1，備用。依前法測定TA和EA，并計算毒效因子，結果見圖5。結果表明，濃縮條件對生附子毒效因子影響很大，對炮制品影響較小。提示炮制品毒效組分比較穩定，能耐熱。

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